關(guān)于化學(xué)發(fā)光磁珠的免疫分選你一定要了解這些知識
更新時間:2021-08-26 點擊次數(shù):1896
化學(xué)發(fā)光磁珠將固化試劑*的優(yōu)點與免疫學(xué)反應(yīng)的高度特異性結(jié)合于一體,以免疫學(xué)為基礎(chǔ),滲透到病理、生理、藥理、微生物、生化以及分子遺傳學(xué)等各個領(lǐng)域,其在免疫檢測、細(xì)胞分離、生物大分子純化和分子生物學(xué)等方面得到了越來越廣泛的應(yīng)用。
化學(xué)發(fā)光磁珠的分選:
免疫磁珠細(xì)胞分選方法可以在幾分鐘內(nèi)從復(fù)雜的細(xì)胞混合物中分離出很高純度的細(xì)胞。把細(xì)胞用超級順磁性的MACSMicroBeads(MACS微型磁珠)特異性地標(biāo)記,磁性標(biāo)記完后,把這些細(xì)胞通過一個放在強(qiáng)而穩(wěn)定磁場中的分選柱。分選柱里的基質(zhì)造成一個高梯度磁場。被磁性標(biāo)記的細(xì)胞滯留在柱里而未被標(biāo)記的細(xì)胞則流出。當(dāng)分選柱移出磁場后,滯留柱內(nèi)的磁性標(biāo)記細(xì)胞就可以被洗脫出來,這樣就*可以獲得標(biāo)記和未標(biāo)記的兩個細(xì)胞組份。
超順磁性的MACSMicroBeads的體積很小,其直徑約為50nm,體積約小于真核細(xì)胞的一百萬份之一,可與病毒的大小相比。標(biāo)記細(xì)胞上的微型磁珠即使在掃描電鏡照片上也幾乎看不到。磁性抗體和磁性標(biāo)記物間的反應(yīng)可在幾分鐘內(nèi)完成。
由于微型磁珠的體積極小,所以不會對細(xì)胞造成機(jī)械性壓力,而且使孵育時間短,操作過程快。MicroBeads形成一個穩(wěn)定的膠體液,它們在磁場中既不沉淀又不凝聚。微型磁珠的大小和它的組成成份(氧化鐵和多糖)使其可被生物降解,且不會激活細(xì)胞或影響細(xì)胞的功能和活力,細(xì)胞的生理功能也不變。磁珠不需要去除,因此,陽性分選出的細(xì)胞(即磁性標(biāo)記細(xì)胞)可立即用于分析和隨后的實驗。
用MACS細(xì)胞分選系統(tǒng)可以分離出非常純的細(xì)胞群體,而且有的回收率和存活率。依據(jù)細(xì)胞頻率和標(biāo)記表達(dá)水平的不同,MACS分離細(xì)胞的純度可達(dá)95%-99.9%,回收率>90%。